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           链反应(polymerase chain reaction,PCR)体系:cDNA              表 1 COPD 患者 ICS 治疗前后观察指标比较( ±s,n=86)
                                                               Table 1 Comparison of pulmonary function parameters,CAT score,and
           2 μl、PreMix 10 μl、10 μmol/l 上游引物与下游引物
                                                               serum miR-210 and miR-181a levels before and after four-week budesonide
           各 0.4 μl、去离子水 7.2 μl,在荧光定量 PCR 仪上进                  and formoterol inhalation treatment in COPD patients
           行反应:95 ℃ 15 min、94 ℃ 20 s、60 ℃ 34 s,重复 40                                               血清     血清
                                                                观察    FVC    FEV 1  PEF   CAT 评分
           个循环,PCR 仪自动生成循环曲线后得到阈值,以 U6                          时间    (L)   (L)    (L/s)  (分)     miR-210  miR-181a
                                                                                                  表达水平   表达水平
           为内参,计算 miR-210、miR-181a 的表达水平。                      治疗前 2.49±0.76 1.38±0.44 3.61±0.93 16.33±4.10 22.01±6.17 1.38±0.47
           1.3 临床资料 收集 COPD 患者一般资料,包括年龄、                       治疗后 2.78±0.81 1.60±0.51 4.32±1.03 11.57±3.27 17.41±5.29 1.09±0.32
           性别、体质指数(BMI)、戒烟时间、病程;分析治疗前、                          t 值   2.421  3.029  4.745  8.417   5.249  4.730
           治疗 4 周后肺功能指标(FVC、FEV 1 、PEF)、CAT 评分、                 P 值   0.017  0.003  <0.001  <0.001  <0.001  <0.001
           血清 miR-210 及 miR-181a 表达水平。                            注:FVC= 用力肺活量,FEV 1 = 第 1 秒用力呼气容积,PEF= 最大
           1.4 统计学方法 采用 SPSS 19.0 统计学软件进行数据                    呼气流量,CAT= 慢性阻塞性肺疾病评估测试,miR= 微小核糖核酸
           分析,符合正态分布的计量资料以( ±s)表示,组内
                                                               表 2 ICS 治疗前血清 miR-210、miR-181a 表达水平与肺功能指标、
           比较采取配对 t 检验;计数资料以相对数表示,组间比                          CAT 评分的相关性分析(n=86)
                   2
           较采用 χ 检验;采用 Pearson 相关分析探讨血清 miR-                   Table 2 Correlations of serum miR-210 and miR-181a levels with lung
                                                               function parameters and CAT score in COPD patients before four-week
           210、miR-181a 表达水平与肺功能指标及 CAT 评分的
                                                               budesonide and formoterol inhalation
           相关性,绘制受试者工作特征曲线(ROC 曲线)以分                                                 治疗前血清          治疗前血清
           析血清 miR-210、miR-181a 表达水平对 COPD 患者 ICS                    观察指标         miR-210 表达水平   miR-181a 表达水平
           治疗效果的预测价值。以 P<0.05 为差异有统计学意义。                                            r 值    P 值     r 值    P 值
           2 结果                                                     治疗前 FVC        -0.209  0.055  -0.193  0.075
                                                                                   -0.177  0.103  -0.181  0.095
           2.1 一般资料 共纳入 COPD 稳定期患者 86 例,其                           治疗前 FEV 1
                                                                    治疗前 PEF        -0.169  0.120  -0.172  0.113
           中男 58 例、女 28 例;平均年龄(60.9±7.3)岁;平
                                                                  治疗前 CAT 评分       0.584  <0.001  0.604  <0.001
                                2
           均 BMI(22.3±1.4)kg/m ;病程 2~23 年,平均病程
           (13.2±4.3)年。戒烟时间均超过半年,平均戒烟时间                        表 3 ICS 治疗后血清 miR-210、miR-181a 表达与肺功能指标、CAT
           (5.8±1.0)年。                                         评分的相关性分析(n=86)
           2.2 治疗前后 COPD 稳定期患者观察指标比较 ICS 治                     Table 3 Correlation analysis of serum miR-210 and miR-181a levels with
                                                               lung function parameters and CAT score after four-week budesonide and
           疗后 COPD 患者 FVC、FEV 1 、PEF 较治疗前升高,CAT                formoterol inhalation treatment
           评分及血清miR-210、miR-181a表达水平较治疗前降低,                                        治疗后血清           治疗后血清
           差异有统计学意义(P<0.05),见表 1。                                   观察指标         miR-210 表达水平    miR-181a 表达水平
           2.3 ICS 治疗前血清 miR-210、miR-181a 表达水平与                                    r 值    P 值     r 值    P 值
                                                                    治疗后 FVC       -0.211  0.051  -0.206  0.057
           肺功能指标、CAT 评分的相关性 ICS 治疗前血清 miR-
                                                                                  -0.633  <0.001  -0.635  <0.001
                                                                   治疗后 FEV 1
           210、miR-181a 表达水平与 CAT 评分呈正相关(P<0.05),
                                                                    治疗后 PEF       -0.161  0.139  -0.158  0.146
           见表 2。
                                                                  治疗后 CAT 评分      0.198  0.068   0.174   0.109
           2.4 ICS 治疗后血清 miR-210、miR-181a 表达水平与
           肺功能指标、CAT 评分的相关性 ICS 治疗后血清 miR-                     别为 19.65、1.29,灵敏度分别为 0.733、0.779,特异度
           210、miR-181a 表达水平与 FEV 1 呈负相关(P<0.05),              分别为 0.767、0.802。见表 5、图 1。
           见表 3。                                               3 讨论
           2.5 有效组与无效组患者临床资料比较 86 例患者                              COPD 是一种常见的呼吸系统疾病,具有较高的致
           中共有 39 例(45.35%)对 ICS 治疗有效,47 例无效                   死率和致残率。有学者指出,COPD 患者气道、肺组织
           (54.65%)。有效组治疗前与治疗后的血清 miR-210、                     多存在由巨噬细胞等多种炎性细胞参与的慢性炎症                     [9] ,
           miR-181a 表达水平低于无效组(P<0.05);有效组、                     最显著特征为气流受限          [10] ,COPD 的治疗以减轻呼吸
           无效组的年龄、男性性别、BMI、病程、戒烟时间比较,                          道炎症以及改善气流受限为主要目标                 [11] 。COPD 稳定
           差异无统计学意义(P>0.05)。见表 4。                              期患者主要选择糖皮质激素治疗              [12] ,其中 ICS 已被广
           2.6 治疗前 miR-210、miR-181a 表达水平对 COPD 稳               泛应用。目前 COPD 患者诊疗指南主要根据患者急性加
           定期患者 ICS 治疗效果的预测价值分析 治疗前 miR-                       重史、改良呼吸困难评分、CAT 评分综合评估临床疗
           210、miR-181a 表达水平预测 COPD 稳定期患者 ICS 治                效,但在实际临床工作中,ICS 联合长效 β 2 - 受体激
           疗效果的 ROC 曲线下面积为 0.807、0.844,临界值分                    动剂使用时较难评估 ICS 的治疗效果,且只有部分患者
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