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           目 的 片 段 长 度 为 186 bp。 反 应 体 系：5×Prime STAR          点突变，17.86%（15/84）为敏感株，未见 A2064G 位点
           Buffer 10 µl，dNTP Mix 4 µl， 上 下 游 引 物 各 2 µl，       突变；成人 MP A2063G 位点突变阳性率高于儿童，差
                                                                                 2
           高保真酶 0.25 µl，模版 DNA 5 µl。DEPC 水 27 µl。              异有统计学意义（χ =11.765，P=0.001）。
           反 应 条 件：98 ℃ 变 性 2 min；98 ℃ 10 s、55 ℃ 10 s、         2.4 流感病毒与 MP 混合感染情况 915 份 ILI 标本中
           72℃ 1 min，共 35 个循环；72℃延伸 10 min。将 PCR               流感病毒与 MP 混合感染阳性率为 2.84%（26/915），
           产物送至生工生物工程（上海）股份有限公司应用                              其中儿童 ILI 标本中流感病毒与 MP 混合感染阳性率为
           DNA 直接测序法测序，测得序列与美国国立生物技术                           1.73%（10/578），成人 ILI 标本中流感病毒与 MP 混合
           信息中心（National Center for Biotechnology Information，  感染阳性率为 4.75%（16/337）；成人 ILI 标本中流感
           NCBI）已登录的标准株 23SrRNA 基因进行比对              ［6］ 。      病毒与 MP 混合感染阳性率高于儿童，差异有统计学意
                                                                     2
           1.3 统计学方法 采用 SPSS 20.0 软件进行统计学分析。                   义（χ =7.022，P=0.008）。915 份 ILI 标本中甲型流感
           正态分布的计量资料以（ ±s）表示；计数资料以相对                           病毒与 MP 混合感染阳性率为 2.40%（22/915），乙型
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           数表示，组间比较采用 χ 检验或 Fisher's 确切概率法。                    流感病毒与 MP 混合感染阳性率为 0.44%（4/915）。成
           以 P<0.05 为差异有统计学意义。                                 人 ILI 标本中甲型流感病毒与 MP 混合感染阳性率高于
           2 结果                                                儿童，差异有统计学意义〔3.86%（13/337）与 1.56%
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           2.1 一般资料 915 份 ILI 标本中男性标本 425 份，                   （9/578），χ =4.801，P=0.028〕； 而 两 组 MP 与 乙
           女性标本 490 份。儿童标本（<18 岁）578 份，其中男                     型流感病毒混合感染阳性率比较，差异无统计学意义
           性标本 285 份，女性标本 293 份；年龄 0~18 岁，平均                   〔0.89%（3/337）与 0.17%（1/578），P=0.144〕。
           （5.0±3.0）岁。成人标本（≥ 18 岁）337 份，其中男                    3 讨论
           性标本 140 份，女性标本 197 份；年龄 18~74 岁，平均                      流感病毒和 MP 是 ARI 的重要病原，任何年龄、任
           （37.6±13.6）岁。                                       何季节均可发病，我国北方地区以秋、冬季多见                     ［1-3］ 。
           2.2 流感病毒抗原检测结果 915 份 ILI 标本中流感病                     甲型和乙型流感每年呈现季节性流行特点，其中甲型
           毒抗原检测阳性率为 45.25%（414/915），其中单纯甲                     流感可引起全球大流行           ［3，5］ 。根据国家流感中心发布
           型流感病毒占 91.06%（377/414），单纯乙型流感病毒                     的流感监测周报        ［8］ ，2018—2019 年我国北方地区第
           占 8.94%（37/414），未见甲型、乙型流感病毒混合感                      48 周（2018-11-26 至 2018-12-02）进入流感冬季流行
           染病例。儿童 ILI 标本中流感病毒抗原检测阳性率为                          季，2019—2020 年我国北方地区第 52 周（2019-12-23
           44.29%（256/578），其中单纯甲型流感病毒占 91.80%                  至 2019-12-29）进入流感冬季流行季，均以甲型流感
          （235/256），单纯乙型流感病毒占 8.20%（21/256）            ［7］ ；   为主。本研究 915 份 ILI 标本中流感病毒抗原检测阳性
           成人 ILI 标本中流感病毒抗原检测阳性率为 46.88%                       率为 45.25%（414/915），其中甲型流感病毒占 91.06%
          （158/337），其中单纯甲型流感病毒占89.87%（142/158），                （377/414），乙型流感病毒占 8.94%（37/414），未见
           单纯乙型流感病毒占 10.13%（16/158）；儿童流感病                      甲型、乙型流感病毒混合感染病例。与国家流感中心
           毒抗原检测阳性率与成年人比较，差异无统计学意义                             发布的甲型流感为主的结果一致。MP 每 3~7 年出现地
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           （χ =0.577，P=0.447）。                                 区周期性流行，流行时间可长达 1 年，流行年份的发
           2.3 MP 及其耐药基因检测结果 915 份 ILI 标本中 MP                  病率是非流行年份的数倍            ［1-2］ 。由于 MP 感染的临床
           阳性率为 11.91%（109/915），其中儿童 ILI 标本中 MP                表现与流行季节流感类似，叶久红等                 ［4］ 对 2015—2017
           阳性率为 4.34%（25/578），成人 ILI 标本中 MP 阳性                 年武汉市某三甲医院 1 197 例 ILI 病原学检测结果分析
           率为 24.93%（84/337）；成人 ILI 标本中 MP 阳性率高                发现，MP 阳性率为 14.54%，其中 0~13 岁年龄组患者
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           于儿童，差异有统计学意义（χ =86.094，P<0.001）。                    MP 阳性率为 20.53%，14~64 岁年龄组患者 MP 阳性率
           109 份 MP 阳性标本中 77.98%（85/109）存在耐药基                  为 0.24%。王海滨等      ［9］ 对 2017 年北京市朝阳区 ILI 病
           因位点突变，突变位点为 23SrRNA 结构域 V 区 2063 A                  原 谱 分 析 发 现 MP 阳 性 率 为 1.51%，5~14 岁、15~24
           到 G 或者 2064 A 到 G，22.02%（24/109）为敏感株，               岁、25~59 岁、>59 岁年龄组患者 MP 阳性率分别为 0、
           74.31%（81/109）存在 A2063G 位点突变，1.83%（2/109）           1.83%、1.51%、1.21%。史大伟等       ［10］ 对 2018—2019 年
           存在 A2064G 位点突变，1.83%（2/109）存在 A2063G                冬、春季北京地区儿童 ILI 病原学分析发现 MP 阳性率
           位点和 A2064G 位点共同突变。儿童 MP 阳性标本中                       为 1.06%。孔德川等     ［11］ 对 2015—2017 年上海地区成人
           48.00%（12/25）存在 A2063G 位点突变，8.00%（2/25）             ARI 病原学进行分析发现 MP 检出阳性率为 5.33%，<60
           存在 A2064G 位点突变，8.00%（2/25）存在 A2063G 位               岁成人组 MP 检出阳性率高于≥ 60 岁组。秦迪等                ［12］ 对
           点和 A2064G 位点共同突变，36.00%（9/25）为敏感株；                  2018 年北京市西城区 ARI 病原学进行分析发现 >14 岁
           成人 MP 阳性标本中 82.14%（69/84）存在 A2063G 位                组MP阳性率为3.07%，并且MP阳性率在10—12月最高。
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