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           from adults(≥ 18 years). The overall detection rate of influenza viral antigens was 45.25%(414/915). The positive rate of
           influenza A was 91.06%(377/414). Pediatric and adult cases had no statistical difference in the detection rate of influenza viral
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           antigens〔44.29%(256/578)vs 46.88%(158/337),χ =0.577,P=0.447〕. The overall detection rate of MP was 11.91%
           (109/915). Pediatric and adult cases had no statistical difference in the detection rate of MP〔4.34%(25/578)vs 24.93%
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           (84/337),χ = 86.094,P<0.001〕. Of the MP-positive specimens,74.31%(81/109) had A2063G mutations,1.83%
           (2/109) had A2064G mutations,and 1.83%(2/109)had A2063G and A2064G mutations. In children's MP-positive
           specimens,48.00%(12/25)had A2063G mutations,8.00%(2/25) had A2064G mutations,and 8.00%(2/25) had
           A2063G and A2064G mutations,the other 36.00%(9/25)had drug-susceptible strains. Of the adult MP-positive specimens,
           82.14%(69/84) had A2063G mutation,17.86%(15/84)had drug-susceptible strains,and no A2064G mutation was found.
           The rate of presence of drug-resistant gene A2063G mutations in adult specimens was higher than that in pediatric specimens
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           (χ =11.765,P=0.001). Both influenza viruses and MP were detected in 2.84%(26/915)of the specimens. The rate of co-
           presence of influenza viruses and MP in adult specimens was higher than that in pediatric specimens〔4.75%(16/337)vs 1.73%
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           (10/578),χ =7.022,P=0.008〕. Conclusion During winters in 2018—2020,influenza A was the major type of influenza
           prevailing in northern China. MP infection was not rare in patients with ILI,and it was more common in adults than in children.
           The resistance rate of MP to macrolide antibiotics was relatively high. A2063G mutation in the 23SrRNA gene was the major type of
           mutations. Some cases were coinfected with influenza viruses and MP.
               【Key words】 Respiratory tract infections;Influenza,human;Mycoplasma pneumoniae;Adult;Child;Drug
           resistance;Coinfection


               肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)是引起              子管中,置于 -80 ℃或 -20 ℃冰箱中冷冻保存,标本统
           急性呼吸道感染(acute respiratory infection,ARI)的常          一经冷链运输到中心实验室,集中进行 MP 核酸及耐药
           见病原体,以发热、咳嗽为主要表现,部分患者可出现                            基因检测。
           肺外并发症,危及生命。近年来临床出现大环内酯类药                            1.2.2 流感病毒抗原检测 采用甲型 / 乙型流感病毒抗
           物耐药现象,导致患者发热、咳嗽和治疗周期延长                     [1-2] 。  原检测试剂盒(胶体金法)(杭州创新科技生物有限公
           由于临床症状及血常规检测指标与流行性感冒(以下简                            司, 生 产 批 号:AB180204/GB191003/GF200104), 将
           称“流感”)类似        [3] ,叶久红等     [4] 对 2015—2017 年     采集的咽拭子浸在采样管样本抽提液中搅拌。从采样管
           武汉市某三级甲等医院 1 197 例流感样病例(influenza-                  外侧用手指挤压棉棒数次,使样本抽提液充分浸透棉棒,
           like illness,ILI)中 MP 进行检测,发现 MP 阳性率为               然后拔出棉棒,绞出液体进行检测。15min 后观察结果。
           14.54%。因此,本研究对 2018—2020 年我国北方地区                    1.2.3 核酸提取 采取 DNA/RNA 病毒核酸提取试剂
           冬 季(2018 年 12 月 至 2019 年 2 月、2019 年 12 月 至          盒(北京卓诚惠生生物科技股份有限公司,生产批号
           2020 年 2 月)ILI 咽拭子标本进行流感病毒抗原、MP                     20200312)。将采集的咽拭子充分搅拌混匀,取 200 µl
           核酸及 MP 耐药基因检测,以期更好地了解 ILI 中流感                       样本加入到 1.5 ml 离心管中,加入 10 µl 蛋白酶 K,
           病毒和 MP 感染及耐药情况,现报告如下。                               6 µl Carrier RNA,再加入 200 µl 裂解液,旋涡震荡混
           1 对象与方法                                             匀 15 s,室温静置 5 min;加入 400 µl 无水乙醇,震
           1.1  研 究 对 象  收 集 2018 年 12 月 至 2019 年 2 月、         荡 15 s,室温静置 5 min;将混合液转移至离心柱中,
           2019 年 12 月至 2020 年 2 月潍坊、开封、哈尔滨、内                  12 000 rpm 离心 1 min;将离心柱放入新的收集管中,
           蒙古、北京、天津、铜川、咸阳、秦皇岛、丹东、汉                             向离心柱中加入 500 µl 洗涤液,盖上管盖,12 000 rpm
           中、太原、本溪地区各 1 家,漯河地区 2 家,南阳地区                        离心 30 s;将离心柱放入新的收集管中,向离心柱加入
           2 家,总共 17 家三级甲等医院门诊就诊的 915 份 ILI 的                  500 µl 漂洗液,盖上管盖,12 000 rpm 离心 30 s;将离
           咽拭子标本。纳入标准:以《全国流感监测方案(2017                          心柱放入新的收集管中,12 000 rpm 离心 3 min;将离
           年版)》    [5] 中 ILI 为标准,即发热(体温≥ 38 ℃),                心柱放入新的 RNase-Free 离心管(1.5 ml)中,打开离
           伴咳嗽或咽痛之一者。排除标准:(1)病程 >72 h;                         心柱管盖,室温放置 10 min,加入 100 µl 洗脱液,盖
          (2)有明确细菌感染或明确诊断为其他疾病的患者;(3)                          上盖子,室温放置 3 min,12 000 rpm 离心 1 min,收集
           新型冠状病毒肺炎(COVID-19)阳性。                               洗脱液,放入 -80 ℃冰箱保存,以备后续实验检测。
           1.2 研究方法                                            1.2.4 MP 及其耐药基因检测 应用荧光定量聚合酶链
           1.2.1 咽拭子标本采集 采集咽拭子标本采用尼龙材质                         式反应(PCR)法扩增 ILI 标本 MP 的 23SrRNA 基因,
           植绒拭子,所有入组病例同时采集 2 支咽拭子,一支立                          上游引物序列 5'-GACACCCGTTAGGCGCAA-3',下游引
           即进行流感病毒抗原检测并记录结果,另一支放入咽拭                            物序列5'-CTGGATAACAGTTACCAATTAGAACAGC-3',
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