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(DAPI)封片,采用共聚焦显微镜观察,通过图像采 态分布计量资料以 M(P 25 ,P 75 )表示,多组间比较采
集系统采集图像,Image J 软件对各组荧光强度(IOD) 用非参数检验,其中正常对照组和 SY 各剂量组分别与
进行半定量分析。 MRL/lpr 组比较采用配对秩和检验。以 P<0.05 为差异有
1.5.7 肾脏组织靶标蛋白检测 采用 Western blotting 法 统计学意义。
对肾脏组织靶标蛋白进行半定量分析。组织样本中加入 2 结果
RIPA 裂解液,研磨粉碎,超声波破碎仪裂解肾脏细胞, 2.1 各组小鼠一般情况对比 截至给药结束,正常对
12 000 r/min、4 ℃离心 30 min,取上清液,采用 BCA 法 照组 6 只小鼠存活,MRL/lpr 组 3 只小鼠存活,SY 低、
测样本蛋白浓度并配平,上样、电泳、转膜、封闭、一 中、高剂量组分别有 5、7、9 只小鼠存活。
抗(1∶1 000)孵育、二抗(1∶1 000)孵育(括号内为 自干预第 8 周起,MRL/lpr 组和 SY 各剂量组小鼠
稀释比例),一抗靶标蛋白为 α-SMA、Collagen Ⅰ、 开始出现不同程度的皮损;与 MRL/lpr 组相比,SY 各
Fibronectin、C3、C5、CD35、GAPDH, 显 影 成 像。 使 剂量组小鼠头面部及躯干部皮损较轻(图 1)。SY 各
用 Image J 软件对各组靶标蛋白及内参蛋白条带灰度值 剂量组小鼠脾脏长度明显小于 MRL/lpr 组(图 1)。
进行半定量分析。 5 组小鼠体征量化分值比较,差异有统计学意义
1.6 统计学方法 采用 GraphPad Prism 8.0.1 软件进行 (P<0.05)。正常对照组、SY 中剂量组、SY 高剂量组
统计学分析。计量资料首先进行 Shapiro-wilk 正态性检 小鼠体征量化分值均低于 MRL/lpr 组,差异有统计学意
验,符合正态分布的资料以( ±s)表示,多组间比较 义(P<0.05),见表 1。
采用单因素方差分析,其中正常对照组和 SY 各剂量组 2.2 5 组小鼠干预第 9、10、11、12、13 周 UPCR 比较
分别与 MRL/lpr 组比较采用 Dunnett-t 检验。不符合正 5 组小鼠干预第 9、10、11、12、13 周 UPCR 比较,
正常对照组 MRL/lpr 组 SY 低剂量组 SY 中剂量组 SY 高剂量组
A
B
C
注:A 为小鼠头面部体征,B 为小鼠躯干体征,C 为实验终点时小鼠脾脏长度;SY= 肾怡
图 1 26 周龄不同组小鼠的体征图
Figure 1 Signs of 26-week-old mice in five groups