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意 义（P>0.05）。 其 中 脓 毒 症 组 WBC、NEU、ALT、 胞 TLR mRNA 和 PCT 水平高于非脓毒症组和对照组，
AST、DBiL 较非脓毒症组、对照组均升高，差异有统 差异有统计学意义（P<0.01）；非脓毒症组外周血单个
计学意义（P<0.05）； 脓 毒 症 组 RBC、Hb、HCT、 核细胞 TLR4 mRNA 和 PCT 水平均高于对照组，差异有
PLT 较非脓毒症组、对照组均降低，差异有统计学意义 统计学意义（P<0.01），见表 5。
（P<0.05），见表 3。 脓毒症组革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌和其他病
2.2 非脓毒症组和脓毒症组 qSOFA、感染病原和感染 原菌感染患者 TLR4 mRNA 分别为 0.154（0.302）、0.139
部位情况 非脓毒症组和脓毒症组 qSOFA 比较，差异 （0.493）、0.119（0.206） 和 0.151（0.336）， 脓 毒 症
有统计学意义（P=0.002）。脓毒症组与非脓毒症组感 组 4 种感染病原患者 TLR4 mRNA 比较，差异无统计学
染病原比较，差异有统计学意义（P=0.033）；脓毒症 意义（H=0.378，P=0.945）。非休克亚组和合并休克亚
组患者中感染最多的病原微生物是革兰阴性菌，其次是 组分别为 35、75 例，非休克亚组和合并休克亚组 TLR4
真菌与革兰阳性菌；非脓毒症组中感染最多的病原微生 mRNA 水平分别为 0.118（0.323）和 0.210（0.330），
物种类也是革兰阴性菌，其次是革兰阳性菌与真菌。脓 两亚组 TLR4 mRNA 水平比较，差异有统计学意义
毒症组与非脓毒症组感染部位比较，差异有统计学意义 （Z=1.473，P=0.026）。
（P=0.003）。脓毒症组患者感染最多的部位是肺，其 2.4 外周血单个核细胞 TLR4 mRNA 和 PCT 单独或联
次是泌尿系统与肝胆系统；非脓毒症组患者感染最多的 合检测对脓毒症的诊断价值 外周血单个核细胞 TLR4
部位是肺，其次是泌尿系统与皮肤和软组织，见表 4。 mRNA 单独诊断脓毒症的 AUC 为 0.813 时，对应的截
2.3 外周血单个核细胞 TLR4 mRNA 检测结果 三组外 断 值 为 0.056，95%CI 为（0.760，0.859）， 灵 敏 度 为
周血单个核细胞 TLR mRNA 和 PCT 水平比较，差异有 80.00%，特异度为 68.97%，约登指数为 0.489 7；血清
统计学意义（P<0.05），其中脓毒症组外周血单个核细 PCT 单独诊断脓毒症的 AUC 为 0.818 时，对应的截断
值 为 0.070μg/L，95%CI 为（0.768，0.861）， 灵 敏 度
2.0 TLR4
GAPDH 为 87.63%，特异度为 75.94%，约登指数为 0.635 6；联
合检测诊断脓毒症的 AUC 为 0.888 时，95%CI 为（0.841，
1.5
-d（RFU）/dT 1.0 0.925），灵敏度为 68.04%，特异度为 93.10%，约登指
数为 0.611 4，见图 2。
3 讨论
0.5
脓毒症发展迅速，死亡率高达 25%~30% ［12］ ，因
0 此及时诊断脓毒症对脓毒症治疗至关重要。本研究结果
60.0 65.0 70.0 75.0 80.0 85.0 90.0 95.0
温度（℃） 显示，脓毒症组较非脓毒症组和对照组 WBC、NEU、
注：RFU= 相对荧光单位，TLR4=Toll 样受体 4 ALT、AST、DBiL 升高，RBC、Hb、HCT、PLT 降低，
图 1 荧光定量 PCR 熔解曲线图 与 HORNIK 等 ［13］ 研究结果相同。WBC 与 NEU 是临床
Figure 1 Fluorescence melting curve analysis of PCR for TLR4 mRNA ［1］
and GAPDH quantitation 判断有无炎症的基本指标 。中性粒细胞可通过释放

表 2 实时荧光定量 PCR 引物序列
Table 2 Sequences of primers for real-time fluorescence quantitative PCR amplification of TLR4 mRNA and GAPDH
项目 正向（5'-3'） 反向（3'-5'） 片段长度（bp）
TLR4 TGAGTTTCAAAGGTTGCTGTTCTC AGGAATACTGAAAACTCACTCATTTGTT 178
GAPDH CGGATTTGGTCGTATTGG GATGATGACCCTTTTGGC 340
注：TLR4=Toll 样受体 4
表 3 三组实验室检查指标比较〔M（QR）〕
Table 3 Comparison of laboratory indicators of three groups of patients
RBC WBC NEU Hb PLT ALT AST DBiL TBiL
组别 例数 9 9 9 HCT 9
（×10 /L） （×10 /L） （×10 /L） （g/L） （×10 /L） （U/L） （U/L） （μmol/L） （μmol/L）
对照组 95 4.85（0.60） 6.34（1.73） 3.54（1.26） 150.0（17.5） 0.44（0.06） 241（111） 18.0（9.5） 19（6） 4.15（1.92） 13.80（6.90）
非脓毒症组 113 4.25（0.84） a 6.39（3.93） a 4.29（4.03） a 124.5（21.5） a 0.38（0.08） a 210（111） a 17.0（22.0） a 20（11） a 4.70（4.35） a 14.60（11.76）
ab
脓毒症组 110 3.62（1.20） ab 12.12（10.51） 11.11（9.17） ab 102.5（35.2） ab 0.35（0.19） ab 125（144） ab 25.0（56.0） ab 35（64） ab 6.80（12.10） ab 17.41（23.88）
H 值 100.173 54.549 83.666 112.046 34.99 51.266 9.745 32.646 13.555 2.019
P 值 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 0.008 <0.001 0.001 0.364
注：RBC= 红细胞计数，WBC= 白细胞计数，NEU= 中性粒细胞计数，Hb= 血红蛋白，HCT= 血细胞比容，PLT= 血小板计数，ALT= 丙氨酸
b
a
氨基转移酶，AST= 天冬氨酸氨基转移酶，DBiL= 直接胆红素，TBiL= 总胆红素； 表示与对照组相比 P<0.05， 表示与非脓毒组相比 P<0.05