中国全科医学
2023, 26 (
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3050-3060.
背景 缺血性脑卒中发病率、死亡率、致残率均较高，溶栓后的再灌注损伤对患者影响较大，针刺是治疗本病的特色疗法，但作用机制尚不明确。
目的 探讨"通督调神"电针预处理对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠miR-124-3p/糖原合成酶激酶β（GSK-3β）/亲环素D（Cyp-D）信号通路及线粒体膜通透性转换孔（MPTP）的影响，探讨其防治CIRI的可能机制。
方法 2022年6—8月，将100只清洁级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、抑制剂组和电针+激动剂组，每组20只。造模前干预7 d，电针组、电针+激动剂组选取通督调神穴组：百会、风府、大椎穴进行电针干预，1次/d，连续7 d；造模前24 h电针+激动剂组和抑制剂组分别侧脑室注射miR-124激动剂和抑制剂（5 nmol）。除假手术组，余组采用改良线栓法制备大鼠右侧脑缺血再灌注模型；造模成功后，取大鼠右侧脑皮质，采用改良神经功能损伤评分量表（mNSS）、TTC染色观察各组大鼠神经功能损伤程度，TUNEL染色以及透射电镜观察神经细胞损伤情况；免疫荧光染色、Western blotting、实时荧光定量PCR检测各组大鼠脑皮质GSK-3β、p-GSK-3β、Cyp-D、细胞色素C（Cyt-C）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）表达；流式细胞检测MPTP开放程度，MPTP阳性细胞率越高，代表MPTP开放程度越大。
结果 除假手术组，各组大鼠均造模成功。与假手术组比较，模型组大鼠mNSS评分及相对脑梗死体积均增加，线粒体结构破坏严重，细胞凋亡指数升高，p-GSK-3β、Cyp-D阳性表达分别减弱和增强，miR-124-3p及Cyp-D、Cyt-C、Caspase-3 mRNA表达增高，p-GSK-3β/ GSK-3β值降低，Cyp-D、Cyt-C、Caspase-3蛋白相对表达量增高，MPTP开放程度增加（P<0.05）。与模型组比较，电针组、抑制剂组mNSS评分及相对脑梗死体积均降低，线粒体结构破坏减轻，p-GSK-3β/GSK-3β增加，Caspase-3蛋白相对表达量降低；电针+激动剂组GSK-3β mRNA表达增高（P<0.05）；电针组、抑制剂组、电针+激动剂组细胞凋亡指数降低，p-GSK-3β、Cyp-D阳性表达分别减弱和增强，miR-124-3p及Cyp-D、Cyt-C、Caspase-3 mRNA表达降低，Cyp-D、Cyt-C蛋白相对表达量降低，MPTP开放程度降低（P<0.05）。与电针组比较，抑制剂组p-GSK-3β阳性表达增强，Cyp-D阳性表达减弱，miR-124-3p及Cyp-D、Cyt-C、Caspase-3 mRNA表达降低，GSK-3β mRNA表达增高，Cyp-D、Cyt-C蛋白相对表达量降低，MPTP开放程度降低（P<0.05）；电针+激动剂组细胞凋亡指数增高，p-GSK-3β阳性表达减弱，Cyp-D阳性表达增强，miR-124-3p、Cyt-C、Caspase-3 mRNA表达增高，Cyp-D、Cyt-C蛋白相对表达量增高，MPTP开放程度增加（P<0.05）。
结论 "通督调神"电针预处理可减轻CIRI大鼠神经损伤，其机制可能与介导miR-124-3p/GSK-3β/Cyp-D信号通路、抑制MPTP开放进而减轻细胞损伤相关。这一研究结果从机制上进一步验证了"通督调神"针法治疗CIRI的疗效，同时为中医"治未病"提供新的科学依据，促进临床应用。
