电针对缺血再灌注后学习记忆障碍大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路的影响及对海马神经元保护作用研究

doi:10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0115

中国全科医学 ›› 2023, Vol. 26 ›› Issue (33): 4187-4193.DOI: 10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0115

电针对缺血再灌注后学习记忆障碍大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路的影响及对海马神经元保护作用研究

苏凯奇¹, 吕转¹, 吴明莉¹, 罗萌¹, 高静¹, 聂晨晨², 刘昊², 冯晓东¹^,²^,^*()

1．450000　河南省郑州市，河南中医药大学第一附属医院康复中心
2．450046　河南省郑州市，河南中医药大学康复医学院

收稿日期:2023-02-01 修回日期:2023-05-28 出版日期:2023-11-20 发布日期:2023-06-13
通讯作者: 冯晓东
作者贡献：苏凯奇负责文章的构思设计及论文的撰写；苏凯奇、吕转、罗萌、聂晨晨、刘昊负责动物实验实施、数据收集整理；吴明莉、高静负责实验管理及数据分析；冯晓东负责文章的质量控制及终稿的审校，对论文负责。
基金资助:
国家自然科学基金联合基金项目(U2004131); 国家自然科学基金面上项目(82174473)

Effect of Electroacupuncture on BDNF/TrkB/PI3K/Akt Pathway and Hippocampal Neuronal Protection in Rats with Learning and Memory Impairment after Ischemia Reperfusion

SU Kaiqi¹, LYU Zhuan¹, WU Mingli¹, LUO Meng¹, GAO Jing¹, NIE Chenchen², LIU Hao², FENG Xiaodong¹^,²^,^*()

1. Rehabilitation Center, the First Affiliated Hospital of Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450000, China
2. Department of Rehabilitation Medicine, Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450046, China

Received:2023-02-01 Revised:2023-05-28 Published:2023-11-20 Online:2023-06-13
Contact: FENG Xiaodong

分享到

摘要/Abstract

摘要： 背景学习记忆障碍是脑卒中后常见的功能障碍之一，严重影响患者的整体康复。电针神庭、百会对脑卒中后认知功能障碍患者具有确切疗效，但其作用机制尚未十分明确。目的观察电针对大脑中动脉缺血再灌注（MCAO/R）后学习记忆障碍大鼠海马神经元保护作用及对脑源性神经生长因子（BDNF）/酪氨酸受体激酶B（TrkB）/磷脂酰肌醇3羟激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路的影响。方法 2021年5月—2022年3月选取60只8周龄健康雄性、SPF级SD大鼠，取24只大鼠分为空白组（n=12）、假手术组（n=12），其余36只大鼠构建MCAO/R模型。将造模成功的24只大鼠随机分为模型组（n=12）和电针组（n=12）。电针组于神庭、百会穴进行电针治疗，采用进行Zea-Longa评分观察各组大鼠神经功能缺损程度，采用空间探索实验评价大鼠空间学习记忆能力，采用TTC染色观察大鼠脑梗死体积。采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）测定BDNF、TrkB、PI3K、Akt mRNA水平，Western blotting检测BDNF、TrkB蛋白水平及PI3K、Akt蛋白磷酸化水平。结果术后2 h模型组、电针组Zea-Longa评分与空白组、假手术组比较，差异有统计学意义（P<0.05），治疗第7天、治疗第14天模型组Zea-Longa评分与空白组、假手术组、电针组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗第9~13天模型组逃避潜伏期均大于假手术组（P<0.05），电针组均低于模型组（P<0.05）。模型组穿越平台有效区域次数低于空白组、假手术组（P<0.05），电针组高于模型组（P<0.05）。空白组、假手术组、模型组、电针组大鼠脑梗死体积占比分别为0、0、（36.7±6.3）%、（24.0±2.2）%，电针组大鼠脑梗死体积低于模型组（P<0.05）。模型组BDNF、TrkB、PI3K、Akt mRNA水平低于空白组、假手术组（P<0.05），电针组BDNF、TrkB、PI3K、Akt mRNA水平高于模型组（P<0.05）。与假手术组相比，模型组BDNF、TrkB蛋白水平均下降（P<0.01，P<0.001），p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白水平下降（P<0.01，P<0.05）；与模型组相比，电针组BDNF、TrkB蛋白水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白水平均升高（P<0.05）。结论电针可能通过上调BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路相关蛋白表达，减轻神经功能缺损症状，改善脑缺血再灌注后学习记忆能力。

关键词: 卒中, 再灌注损伤, 记忆障碍, 电针疗法, CA1区，海马, 神经生长因子类

Abstract:

Background

Learning and memory impairment is a common dysfunction after stroke, which seriously affects the overall recovery of patients. Electroacupuncture at Shenting and Baihui has definite efficacy in patients with cognitive dysfunction after stroke, but its mechanism of action remains uncertain.

Objective

To observe the effect of electroacupuncture on hippocampal neuronal protection and brain-derived nerve growth factor (BDNF) /tyrosine receptor kinase B (TrkB) /phosphatidylinositol-3-hydroxykinase (PI3K) /protein kinase B (Akt) signaling pathway in rats with learning and memory impairment after middle cerebral artery occlusion reperfusion (MCAO/R) .

Methods

A total of 60 8-week-old healthy male SD rats were selected from May 2021 to March 2022, and 24 rats were divided into the blank group (n=12) and sham operation group (n=12), and the other 36 rats were constructed as MCAO/R model. The 24 rats with successful modeling were randomly divided into the model group (n=12) and electroacupuncture group (n=12). The electroacupuncture treatment was performed at Shenting and Baihui points in the electroacupuncture group. Zea-Longa score was used to observe the degree of neurological impairment in each group. Spatial probe test was used to evaluate the spatial learning and memory ability of the rats. TTC staining was used to observe the volume of brain infarction in rats. RT-PCR was used to measure the mRNA levels of BDNF, TrkB, PI3K and Akt, Western blotting was used to detect the protein levels of BDNF and TrkB and the levels of p-PI3K/PI3K and p-Akt/Akt.

Results

Zea-Longa score of the model group and electroacupuncture group was significantly different from the blank group and sham operation group at 2 h after surgery (P<0.05), and Zea-Longa score of the model group was significantly different from the blank group, sham operation group and electroacupuncture group at 7 and 14 days after treatment (P<0.05). During the 9th to 13th day of treatment, the escape latency in the model group was higher than the sham operation group (P<0.05), and lower in the electroacupuncture group than the model group (P<0.05). The frequency of crossing the effective region of the platform in the model group was lower than the blank group and sham operation group (P<0.05), and higher in the electroacupuncture group than the model group (P<0.05). The volume of cerebral infarction in blank group, sham operation group, model group and electroacupuncture group was 0, 0, (36.7±6.3) % and (24.0±2.2) %, respectively, and the volume of cerebral infarction in the electroacupuncture group was lower than the model group (P<0.05). The mRNA levels of BDNF, TrkB, PI3K and Akt in the model group were lower than the blank group and sham operation group (P<0.05), and higher in the electroacupuncture group than the model group (P<0.05). Compared with sham operation group, the protein levels of BDNF and TrkB (P<0.01, P<0.001), the levels of p-PI3K/PI3K and p-Akt/Akt (P<0.01, P<0.05) in model group were decreased; compared with the model group, the protein levels of BDNF and TrkB and the levels of p-PI3K/PI3K and p-Akt/Akt in electroacupuncture group were increased (P<0.05) .

Conclusion

Electroacupuncture may reduce the symptom of neurological function deficits and improve the learning and memory ability of rats after cerebral ischemia reperfusion by upregulating the expression of BDNF/TrkB/PI3K/Akt pathway related proteins.

Key words: Stroke, Reperfusion Injury, Memory disorders, Electroacupuncture therapy, CA1 region, hippocampal, Nerve growth factors

苏凯奇,吕转,吴明莉,等. 电针对缺血再灌注后学习记忆障碍大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路的影响及对海马神经元保护作用研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(33): 4187-4193. DOI: 10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0115.
SU Kaiqi,LYU Zhuan,WU Mingli, et al. Effect of Electroacupuncture on BDNF/TrkB/PI3K/Akt Pathway and Hippocampal Neuronal Protection in Rats with Learning and Memory Impairment after Ischemia Reperfusion[J]. Chinese General Practice, 2023, 26(33): 4187-4193. DOI: 10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0115.

图/表 10

参考文献 23

[1]	GBD Causes of Death Collaborators. Global，regional，and national age-sex specific mortality for 264 causes of death，1980-2016：a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016[J]. Lancet，2017,390(10100):1151-1210. DOI：10.1016/S0140-6736(17)32152-9.
[2]	KLEINDORFER D O, TOWFIGHI A, CHATURVEDI S，et al. 2021 guideline for the prevention of stroke in patients with stroke and transient ischemic attack：a guideline from the American heart association/American stroke association[J]. Stroke，2021,52(7):e364-467. DOI：10.1161/STR.0000000000000375.
[3]	中国卒中学会，卒中后认知障碍管理专家委员会. 卒中后认知障碍管理专家共识[J]. 中国卒中杂志，2017,12(6):519-531. DOI：10.3969/j.issn.1673-5765.2017.06.011.
[4]	高静，白艳杰，冯晓东. 《欧洲卒中组织与欧洲神经病学学会卒中后认知障碍的联合指南》解读[J]. 华西医学，2022,37(5):641-645. DOI：10.7507/1002-0179.202204020.
[5]	苏凯奇，高静，李洁莹，等. 基于古今医案云平台分析针刺治疗中风后认知障碍选穴规律[J]. 中国针灸，2022,42(1):99-103. DOI：10.13703/j.0255-2930.20201123-k0001.
[6]	刘娇，冯晓东. 电针百会、神庭穴配合康复训练治疗脑卒中后认知障碍临床研究[J]. 中医学报，2013,28(4):608-610.
[7]	薛洋，孙伟娟，刘飞来，等. 电针神庭、百会联合功能康复训练治疗脑卒中后认知障碍42例[J]. 中医研究，2018,31(1):57-60. DOI：10.3969/j.issn.1001-6910.2018.01.25.
[8]	NIKOLETOPOULOU V, SIDIROPOULOU K, KALLERGI E，et al. Modulation of autophagy by BDNF underlies synaptic plasticity[J]. Cell Metab，2017,26(1):230-242.e5. DOI：10.1016/j.cmet.2017.06.005.
[9]	COLUCCI-D'AMATO L, SPERANZA L, VOLPICELLI F. Neurotrophic factor BDNF，physiological functions and therapeutic potential in depression，neurodegeneration and brain cancer[J]. Int J Mol Sci，2020,21(20):7777. DOI：10.3390/ijms21207777.
[10]	LI L X, CHU J H, CHEN X W，et al. Selenium ameliorates mercuric chloride-induced brain damage through activating BDNF/TrKB/PI3K/AKT and inhibiting NF-κB signaling pathways[J]. J Inorg Biochem，2022,229:111716. DOI：10.1016/j.jinorgbio.2022.111716.
[11]	WANG H L, LIU F L, LI R Q，et al. Electroacupuncture improves learning and memory functions in a rat cerebral ischemia/reperfusion injury model through PI3K/Akt signaling pathway activation[J]. Neural Regen Res，2021,16(6):1011-1016. DOI：10.4103/1673-5374.300454.
[12]	LONGA E Z, WEINSTEIN P R, CARLSON S，et al. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J]. Stroke，1989,20(1):84-91. DOI：10.1161/01.str.20.1.84.
[13]	黎帅，谭洁，张泓，等. 穴位埋线对慢性缺血性认知障碍模型大鼠空间学习记忆能力及海马兴奋性氨基酸毒性相关蛋白的影响[J]. 针刺研究，2018,43(6):347-352. DOI：10.13702/j.1000-0607.170385.
[14]	李忠仁. 实验针灸学[M]. 2版. 北京：中国中医药出版社，2007.
[15]	詹杰，潘锐焕，郭友华，等. 针刺百会、神庭联合基础治疗和常规康复训练治疗脑卒中后认知障碍：随机对照研究[J]. 中国针灸，2016,36(8):803-806. DOI：10.13703/j.0255-2930.2016.08.007.html.
[16]	WANG D P, YIN H, LIN Q，et al. Andrographolide enhances hippocampal BDNF signaling and suppresses neuronal apoptosis，astroglial activation，neuroinflammation，and spatial memory deficits in a rat model of chronic cerebral hypoperfusion[J]. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol，2019,392(10):1277-1284. DOI：10.1007/s00210-019-01672-9.
[17]	XING Y, ZHANG M, LI W B，et al. Mechanisms involved in the neuroprotection of electroacupuncture therapy for ischemic stroke[J]. Front Neurosci，2018,12:929. DOI：10.3389/fnins.2018.00929.
[18]	SAHAY A S, JADHAV A T, SUNDRANI D P，et al. Differential expression of nerve growth factor（NGF）and brain derived neurotrophic factor（BDNF）in different regions of normal and preeclampsia placentae[J]. Clin Exp Hypertens，2020,42(4):360-364. DOI：10.1080/10641963.2019.1665677.
[19]	高静，赖名殷，梅氏清心，等. 电针对抑郁大鼠前额叶脑源性神经营养因子/哺乳动物雷帕霉素复合物1通路及突触可塑性的影响[J]. 针刺研究，2022,47(1):15-20,32. DOI：10.13702/j.1000-0607.201293.
[20]	MOKHTARI T, AKBARI M, MALEK F，et al. Improvement of memory and learning by intracerebroventricular microinjection of T3 in rat model of ischemic brain stroke mediated by upregulation of BDNF and GDNF in CA1 hippocampal region[J]. Daru，2017,25(1):4. DOI：10.1186/s40199-017-0169-x.
[21]	WANG L, CHANG X Y, SHE L，et al. Autocrine action of BDNF on dendrite development of adult-born hippocampal neurons[J]. J Neurosci，2015,35(22):8384-8393. DOI：10.1523/jneurosci.4682-14.2015.
[22]	WANG S S, ZHU M Y, WANG Q Y，et al. Alpha-fetoprotein inhibits autophagy to promote malignant behaviour in hepatocellular carcinoma cells by activating PI3K/AKT/mTOR signalling[J]. Cell Death Dis，2018,9(10):1027. DOI：10.1038/s41419-018-1036-5.
[23]	LI W Y, YANG Y, HU Z Y，et al. Neuroprotective effects of DAHP and Triptolide in focal cerebral ischemia via apoptosis inhibition and PI3K/Akt/mTOR pathway activation[J]. Front Neuroanat，2015,9:48. DOI：10.3389/fnana.2015.00048.

评分	表现
0分	无缺损症状；无神经损伤
1分	提尾时对侧前肢内收屈曲；轻度神经损伤
2分	向对侧追尾式旋转；中度神经损伤
3分	行走费力且向对侧倾倒；重度神经损伤
4分	不能自发活动伴意识丧失；极重度神经损伤

评分	表现
0分	无缺损症状；无神经损伤
1分	提尾时对侧前肢内收屈曲；轻度神经损伤
2分	向对侧追尾式旋转；中度神经损伤
3分	行走费力且向对侧倾倒；重度神经损伤
4分	不能自发活动伴意识丧失；极重度神经损伤

基因	引物序列（5'→3'）
BDNF	F：GACTCCCCGGCTTGGAGAAG R：CTGAGGGAACCCGGTCTCAT
TrkB	F：GGATTCTGCCTGCTGGTGAT R：ACCCATCCAGGGGGATCTTAT
PI3K	F：ATCGACCTACACTTGGGGGA R：CAATATCTTCTGGCCGGGCT
Akt	F：AGGAGGTCATCGTTGCCAAG R：GGTCGTGGGTCTGGAATGAG
GAPDH	F：ACAGCAACAGGGTGGTGGAC R：TTTGAGGGTGCAGCGAACTT

基因	引物序列（5'→3'）
BDNF	F：GACTCCCCGGCTTGGAGAAG R：CTGAGGGAACCCGGTCTCAT
TrkB	F：GGATTCTGCCTGCTGGTGAT R：ACCCATCCAGGGGGATCTTAT
PI3K	F：ATCGACCTACACTTGGGGGA R：CAATATCTTCTGGCCGGGCT
Akt	F：AGGAGGTCATCGTTGCCAAG R：GGTCGTGGGTCTGGAATGAG
GAPDH	F：ACAGCAACAGGGTGGTGGAC R：TTTGAGGGTGCAGCGAACTT

组别	只数	术后2 h					治疗第7天					治疗第14天
组别	只数	0分	1分	2分	3分	4分	0分	1分	2分	3分	4分	0分	1分	2分	3分	4分
空白组	12	12（100.0）	0	0	0	0	12（100.0）	0	0	0	0	12（100.0）	0	0	0	0
假手术组	12	12（100.0）	0	0	0	0	12（100.0）	0	0	0	0	12（100.0）	0	0	0	0
模型组^abcdef	12	0	1（8.3）	2（16.7）	9（75.0）	0	0	2（16.7）	3（25.0）	7（58.3）	0	0	3（25.0）	7（58.3）	2（16.7）	0
电针组^abgh	12	0	1（8.3）	3（25.0）	8（66.7）	0	0	6（50.0）	4（33.3）	2（16.7）	0	4（33.3）	7（58.3）	1（8.3）	0	0
H值		42.53					42.17					37.81
P值		<0.05					<0.05					<0.05

电针对缺血再灌注后学习记忆障碍大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路的影响及对海马神经元保护作用研究

Effect of Electroacupuncture on BDNF/TrkB/PI3K/Akt Pathway and Hippocampal Neuronal Protection in Rats with Learning and Memory Impairment after Ischemia Reperfusion

RichHTML

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表 10

参考文献 23

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

留言

组别	只数	第9天	第10天	第11天	第12天	第13天
空白组	12	38.6±5.0	31.1±5.9	25.8±4.5	13.9±3.7	8.4±3.3
假手术组	12	37.7±7.2	31.4±6.2	25.1±5.6	14.0±4.2	8.2±3.4
模型组	12	51.9±6.3^ab	42.4±6.0^ab	34.5±5.0^ab	27.5±5.1^ab	20.7±5.9^ab
电针组	12	46.5±6.2^c	37.6±5.1^c	29.5±4.9^c	20.4±3.3^c	12.4±4.2^c
F值		F_交互=1.191，F_组间=52.513，F_时间=277.985
P值		P_交互=0.30，P_组间<0.05，P_时间<0.05

组别	只数	穿越平台次数
空白组	12	7.99±2.71
假手术组	12	7.64±3.20
模型组	12	2.19±1.52^ab
电针组	12	4.87±1.65^c
F值		15.57
P值		<0.05

组别	例数	BDNF	TrkB	PI3K	Akt
空白组	3	1.00±0.09	1.00±0.02	1.00±0.12	1.00±0.20
假手术组	3	0.99±0.04	1.00±0.02	1.03±0.10	1.00±0.10
模型组	3	0.23±0.03^ab	0.48±0.10^ab	0.55±0.04^ab	0.53±0.05^ab
电针组	3	0.76±0.08^c	0.75±0.07^c	0.88±0.16^c	0.90±0.09^c
F值		91.95	44.87	11.45	10.35
P值		<0.05	<0.05	<0.05	<0.05

组别	只数	BDNF	TrkB	p-PI3K/PI3K	p-Akt/Akt
空白组	3	0.32±0.07	0.95±0.04	0.58±0.01	0.33±0.03
假手术组	3	0.32±0.07	0.91±0.06	0.59±0.04	0.35±0.03
模型组	3	0.08±0.03^ab	0.43±0.02^ab	0.31±0.10^ab	0.17±0.02^ab
电针组	3	0.23±0.07^c	0.65±0.06^c	0.54±0.09^c	0.32±0.09^c
F值		10.58	45.22	10.66	7.62
P值		<0.05	<0.05	<0.05	<0.05

[1]	白海威, 米小昆, 刘青蕊, 祝琳, 王英南, 刘俊艳, 韩颖. 血清尿酸对非小细胞肺癌患者围术期急性缺血性卒中的预测价值研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(36): 4545-4551.
[2]	罗伟刚, 尹园园, 刘万虎, 徐玉珠, 曹晓芸, 步玮, 张玲雁, 任慧玲. 三酰甘油葡萄糖指数与单发皮质下梗死患者发生早期神经功能恶化的相关性研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(35): 4419-4424.
[3]	秦凤银, 张绮珊, 赖锦佳, 黄奕敏, 韩郭茵, 孙兴兰, 王芬, 谭益冰. 广东省社区居民脑卒中高危筛查意向的现状及影响因素研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(34): 4283-4289.
[4]	尹苗苗, 崔立玲, 李雅晴, 王利群, 张玥, 巫嘉陵. 双任务对后循环缺血性脑卒中伴前庭症状患者步行能力的影响研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(33): 4207-4212.
[5]	蹇秋枫, 徐荣华, 姚倩, 周媛媛. 中国老年脑卒中患者认知障碍患病率和影响因素的Meta分析[J]. 中国全科医学, 2023, 26(32): 4070-4079.
[6]	杨宇轩, 张晗, 杜娟, 王玲玲, 谢玉磊, 尹开明, 张波. 眼动追踪的动态任务评估脑卒中后单侧空间忽略的价值研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(32): 4020-4025.
[7]	朱琳, 郭闫葵, 高琛, 陈学志, 王法帅. 单纯西药、中成药及其联合治疗卒中后失眠疗效的网状Meta分析[J]. 中国全科医学, 2023, 26(30): 3823-3832.
[8]	肖雨倩, 白艳杰, 王岩, 陈淑颖, 陈丽敏, 孙可心, 万俊. 线粒体转移在脑卒中后认知障碍中的研究进展[J]. 中国全科医学, 2023, 26(30): 3833-3840.
[9]	刘月, 刘琦, 董惠, 刘亚玲. 基于蒙特利尔认知评定量表双阈值定义的卒中后认知"恢复者"神经心理学变化研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(27): 3417-3422.
[10]	郑思婷, 何春渝, 周均, 孔叶, 杨薪瑶, 周海英, 魏晓霏. 脑卒中运动功能障碍患者自我管理的最佳证据总结[J]. 中国全科医学, 2023, 26(26): 3230-3237.
[11]	王晓雯, 肖统领, 王祎, 杨莹, 夏晓爽, 李新. 急性缺血性脑卒中患者同型半胱氨酸水平与急性肾损伤的关系研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(26): 3290-3296.
[12]	杜玉英, 王彩玲, 崔森林, 雷蕾, 王艳萍, 宋学琴, 韩淑琴, 张艳梅, 王宝兰, 黄海霞, 陈祢, 严会荣, 李冬, 张晶晶, 任钰. 新疆维吾尔自治区南部地区脑卒中康复适宜技术推广分析[J]. 中国全科医学, 2023, 26(25): 3178-3184.
[13]	张国庆, 童婷婷, 王颖, 李奎武, 张利达, 吴晓晴, 李成龙, 汪俊丽, 张君宇, 韩为. "通督调神"电针预处理介导miR-124-3p/GSK-3β/Cyp-D信号通路对脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质线粒体通透性转换孔的影响及机制探讨[J]. 中国全科医学, 2023, 26(24): 3050-3060.
[14]	李晓晓, 白艳杰, 王岩, 张雍闯, 陈淑颖, 陈丽敏. 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体在脑卒中后认知障碍中的研究进展[J]. 中国全科医学, 2023, 26(17): 2176-2182.
[15]	沈惠文, 林永忠, 陈淑良, 张立红, 马春野, 马得原, 张策. 基于人工智能算法的脑卒中溶栓药物精准治疗：真实世界研究[J]. 中国全科医学, 2023, 26(17): 2070-2077.