中国全科医学 ›› 2015, Vol. 18 ›› Issue (17): 2101-2104.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.17.028
李勇,檀碧波,范立侨,赵群,王冬,刘羽,刘庆伟
摘要: 目的 检测miR-185在胃癌组织及细胞株中的表达,探讨miR-185在胃癌多药耐药性(MDR)发生机制中的作用。方法 选取2014年3-5月于河北医科大学第四医院行胃癌切除术的20例患者胃癌及癌旁组织标本,荧光定量PCR技术检测胃癌及癌旁组织和人胃腺癌细胞株SGC7901、正常胃上皮细胞株GES-1、耐阿霉素(ADR)的胃癌MDR细胞株SGC7901/ADR的miR-185表达水平。采用miR-185模拟物或无关对照序列转染细胞株SGC7901/ADR,检测其对化疗药物ADR、5-氟尿嘧啶(5-FU)、草酸铂(L-OHP)的敏感性,荧光定量PCR和Western blotting技术检测多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1、GST-π、LRP的mRNA及蛋白表达水平。结果 癌旁组织和胃癌组织miR-185相对表达水平分别为(0.910±0.142)、(0.243±0.045),差异有统计学意义(t=20.025,P<0.001)。细胞株GES-1、SGC7901、SGC7901/ADR miR-185相对表达水平分别为(0.903±0.117)、(0.630±0.101)和(0.191±0.030),差异有统计学意义(F=46.850,P<0.001)。其中,细胞株SGC7901、SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于GES-1,细胞株SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于SGC7901(P<0.05)。ADR、5-FU和L-OHP对不同转染处理后的细胞株SGC7901/ADR抑制率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中,ADR、5-FU和L-OHP对miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR抑制率高于未转染和无关对照序列转染(P<0.05)。经不同转染处理后,细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-π mRNA和蛋白相对表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-π mRNA和蛋白相对表达水平低于未转染和无关对照序列转染(P<0.05)。结论 胃癌细胞miR-185表达下调,通过上调miR-185的表达可提高胃癌细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能是miR-185调控部分多药耐药基因的表达。