摘要： 目的 探讨胰岛素（INS）在抑制缺血再灌注损伤（IRI）诱导的心肌微血管内皮细胞（CMECs）凋亡中的作用及其分子机制。方法 分离和培养大鼠CMECs，建立模拟缺血再灌注（SI/R）模型，分别选用INS、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）特异性抑制剂渥曼青霉素（Wort）和FoxO1/3a干扰RNA处理细胞。采用随机数字表法对大鼠CMECs进行分组：SI/R组（5只大鼠的CMECs），SI/R+INS组（5只大鼠的CMECs），SI/R+INS+Wort组（5只大鼠的CMECs），SI/R+INS+FoxO1 siRNA组（6只大鼠的CMECs），SI/R+INS+FoxO3a siRNA组（4只大鼠的CMECs）。采用末端转移酶标记技术（TUNEL）检测各组CMECs凋亡率，ELISA法检测各组Caspase-3活性，Western blotting法检测各组p-Akt（Ser473）、p-FoxO1（Ser256）、p-FoxO3a（Thr32）、生存素（SVV）蛋白表达水平。结果 与SI/R组比较，SI/R+INS组、SI/R+INS+FoxO1 siRNA组、SI/R+INS+FoxO3a siRNA组CMECs凋亡率及Caspase-3活性均降低（P＜0.01）；而SI/R+INS+Wort组CMECs凋亡率及Caspase-3活性与SI/R组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；与SI/R+INS组比较，SI/R+INS+FoxO1 siRNA组、SI/R+INS+FoxO3a siRNA组CMECs凋亡率及Caspase-3活性升高（P＜0.01）；且SI/R+INS+FoxO1 siRNA组CMECs凋亡率高于SI/R+INS+FoxO3a siRNA组（P＜0.01）。Western blotting检测结果显示:SI/R+INS组p-Akt、p-FoxO1、p-FoxO3a、SVV蛋白表达水平均高于SI/R、SI/R+INS+Wort组、SI/R+INS+FoxO1siRNA组以及SI/R+INS+FoxO3a siRNA组（P＜0.01）；且SI/R+INS+FoxO3a siRNA组SVV蛋白表达水平低于SI/R+INS+FoxO1siRNA组（P＜0.01）。结论 NIS可显著抑制IRI诱导的CMECs凋亡，其机制可能与激活Akt/FoxO/SVV信号通路相关，且主要通过FoxO3a的激活上调SVV蛋白表达水平，从而抑制CMECs凋亡。
