摘要： 目的 探讨黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。方法 2015年3月-2016年1月，取人肝癌细胞系SMMC-7721，制备细胞悬液。加入黄芩素（1、2、5、10、20、50、100、200、300 μmol/L，分别命名为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9组）或LY294002（1、2、5、10、20、30 μmol/L，分别命名为B1、B2、B3、B4、B5、B6组），设定空白对照组和二甲基亚砜（DMSO）对照组，采用CCK8试剂盒检测各组细胞增殖水平；采用20 μmol/L黄芩素（C1组）单独处理，20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002（C2组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用流式细胞术检测各组细胞周期；采用2、5、10、20 μmol/L黄芩素（分别命名为D1、D2、D3、D4组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用显微摄影检测各组细胞数量；采用20 μmol/L黄芩素（E1组）单独处理，20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002（E2组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用流式细胞术检测各组早期凋亡和晚期凋亡情况；采用20 μmol/L黄芩素（F1组）、10 μmol/L LY294002（F2组）或20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002（F3组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法检测细胞外调节蛋白激酶（ERK）1/2、周期素D1（CyclinD1）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT） mRNA表达水平；采用20 μmol/L黄芩素（G1组）、10 μmol/L LY294002（G2组）或20 μmol/L黄芩素联合10 μmol/L LY294002（G3组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721，设定空白对照组和DMSO组，采用Western blotting法检测磷酸化ERK1/2（P-ERK1/2）、CyclinD1、磷酸化GSK-3β（P-GSK-3β）、磷酸化AKT（P-AKT）表达水平。结果 A8组、A9组、B6组细胞增殖水平低于空白对照组、DMSO对照组（P＜0.05）。C2组G0/G1期、G2/M期细胞比例高于空白对照组、DMSO组，S期细胞比例低于空白对照组、DMSO组（P＜0.05）。D4组细胞数量少于空白对照组、DMSO组（P＜0.05）。空白对照组、DMSO组、E1组、E2组早期凋亡和晚期凋亡比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。F3组ERK1/2、CyclinD1、GSK-3β、AKT mRNA表达水平均低于空白对照组、DMSO组（P＜0.05）。G3组P-ERK1/2、CyclinD1、P-GSK-3β、P-AKT表达水平低于空白对照组、DMSO组（P＜0.05）。结论 黄芩素和LY294002可抑制人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖，但不影响其凋亡。

关键词: 肝肿瘤, 细胞增殖, 细胞凋亡, 黄芩素, LY294002, 人肝癌细胞系SMMC-7721