摘要： 目的  体外构建含人LINGO-1慢病毒干扰载体，并测定其对靶基因LINGO-1的干扰效应。方法  2015年3-11月，根据GenBank数据库中报道的人LINGO-1基因序列，设计合成针对人LINGO-1短发夹RNA（LINGO-1 shRNA）干扰序列，并将其克隆至重组质粒载体，测序验证后在293T细胞内包装慢病毒并测定病毒滴度。将慢病毒载体分为目标基因干扰载体组（实验组）和错配序列干扰载体组（对照组），并转染至人胶质细胞瘤细胞U251，荧光显微镜下观察其感染效率,并采用免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）法检测LINGO-1 mRNA表达水平，采用Western blotting法检测LINGO-1表达水平。结果  成功构建两组慢病毒干扰载体，经过包装分别得到滴度为2×108 TU/ml和4×108 TU/ml的病毒原液。病毒载体感染人胶质细胞瘤细胞U251后，实验组和对照组载体转染效率分别为96.6%、95.2%。免疫荧光染色显示，人胶质细胞瘤细胞U251高表达LINGO-1，经慢病毒载体转染后，实验组免疫荧光呈现减弱现象。实验组LINGO-1 mRNA表达水平（0.09±0.01）较对照组的（1.00±0.00）降低（t=12.87，P＜0.01），实验组LINGO-1 mRNA相对表达抑制率为91.0%。实验组LINGO-1表达水平（0.28±0.02）较对照组的（1.00±0.00）降低（t=-8.13,P＜0.01）。结论  本研究成功构建了含人LINGO-1 shRNA干扰载体，并证实了干扰载体对靶基因有较好的干扰效果，为研究LINGO-1在轴突再生中的作用奠定了基础。

关键词: 慢病毒属, RNA干扰, LINGO-1