中国全科医学 ›› 2016, Vol. 19 ›› Issue (02): 190-194.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2016.02.014

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1,25(OH)2D3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

唐玉玲,张春江,马莉,贾林,杨锐,杨晓萍   

  1. 832003新疆石河子市,石河子大学医学院;通信作者:杨晓萍,832003新疆石河子市,石河子大学医学院;E-mail:sbkyxp@163.com
  • 出版日期:2016-01-20 发布日期:2016-01-20
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(81160090);新疆石河子大学高层次人才科研启动资金专项(RCZX201026)

  • Published:2016-01-20 Online:2016-01-20

摘要: 目的  观察1,25-二羟维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对人系膜细胞(HMC)增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25(OH)2D3对HMC增殖调控中的作用。方法  体外培养HMC,取传代培养至第3~7代细胞分为4组:正常对照组(N组)、1,25(OH)2D3组(10-8 mol/L,VD组)、PI3K抑制剂干预组(LY294002 2 μg/ml,LY组),LY294002(2 μg/ml)联合1,25(OH)2D3组(10-8 mol/L)组(LY+VD组),干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况。结果  各实验组吸光度值(A值)比较,差异有统计学意义(F=281.641,P<0.01),其中VD组、LY组和LY+VD组A值均低于N组,LY+VD组A值均分别低于VD组和LY组,差异均有统计学意义(P<0.01)。各实验组G2/M期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组G1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中VD组、LY组和LY+VD组G1期均高于N组,S期和PI均低于N组,LY+VD组G1期均高于VD组,S期和PI均低于VD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各实验组Akt/β-actin、mTOR/β-actin灰度值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中VD组、LY组和LY+VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于N组,LY+VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于VD组和LY组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论  1,25-(OH)2D3可通过PI3K/Akt信号通路抑制体外培养HMC的增殖。

关键词: 骨化三醇, 磷酸肌醇3-激酶类, Akt, 肾小球系膜细胞, 细胞增殖